细胞焦亡（Pyroptosis）是一种由炎症信号引发的程序性细胞死亡方式，具有显著的特点，如细胞膜穿孔及细胞的肿胀和破裂。这一过程主要依赖于炎性半胱天冬酶（如caspase-1、4、5和11），并伴随大量促炎因子的释放，包括IL-1β和IL-18。细胞焦亡的形态特征和发生机制与凋亡及坏死等其他细胞死亡方式不同。

为高效检测细胞焦亡，XPJ推出的BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒，采用比色光度法来监测细胞内相关Caspase的活化情况和细胞膜的破裂情况。该试剂盒基于caspase-1/4/5能催化相应底物生成黄色的pNA，pNA在405 nm附近有强吸收，通过测量吸光度可判断细胞焦亡的相关蛋白酶活性。同时，本试剂盒配备了细胞膜非通透性荧光探针，用于检测细胞质膜的完整性。

使用BBcellProbe®的检测可借助酶标仪、荧光酶标仪、分光光度计及流式细胞仪等设备，对于不同条件下的细胞可进行灵活选择。如果具备荧光检测条件，建议优先使用荧光法进行检测，以提高灵敏度；反之，可以选择XPJ的比色法细胞焦亡检测试剂盒，前提是样品中的细胞焦亡程度需达到一定水平。

实验步骤总结如下：

一、准备裂解缓冲液和检测缓冲液。

二、样品处理：1. 收集细胞并离心2-3分钟，认真吸取培养基，尽量吸干，收集细胞；2. 使用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽量吸干上清；3. 向细胞中加入50 μl冷裂解缓冲液，进行高速涡旋振荡15秒；4. 将样品置于冰上持续振荡25-40分钟；5. 在4℃下以10000×g离心10分钟；6. 吸取上清液放入预冷的干净离心管，置于冰上或-80℃冰箱中保存备用。

三、对处理过的上清液进行蛋白定量。

四、进行焦亡检测.