XPJ细胞培养方案如下：

培养条件

培养基：1640培养基 + 10% FBS + 1% PS，适用于贴壁和悬浮细胞；培养温度：37℃。

传代方法

首次传代建议比例为1:2，必要时可调整至1:1.5。传代后每两天更换培养液，确保细胞健康生长。

备注

购买细胞时，建议同时购买相关培养基，享受更多优惠。收到细胞后，应立即处理，待培养至良好状态后，加入完全培养液并封好瓶口，这是运输细胞的最佳方式。

细胞处理步骤

收到细胞后，使用75%酒精喷洒整个细胞瓶进行消毒，然后在超净工作台内进行严格的无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO₂的培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态，之后再进行处理。

使用显微镜观察细胞生长状态，记录不同倍数下的照片保存（建议40x、100x及200x各一张），前三天的照片为重要售后依据，未提供照片默认收到状态良好。

细胞传代步骤

贴壁细胞传代需遵循以下步骤：

1. 弃去培养上清，用不含钙镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2 ml，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态，当细胞大部分变圆并脱落时，迅速轻敲培养瓶，并添加5ml以上的细胞培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，使其完全脱落后吸出，转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，并补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1:2的比例分瓶传代，补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5% CO₂细胞培养箱中继续培养。

悬浮细胞传代步骤

悬浮细胞传代步骤如下：

1. 采用半换液处理，培养瓶竖立放置1小时，轻轻吸走约3ml培养基，补加3ml新的完全培养基。
2. 如培养基变色缓慢，增加500µl FBS；传代时可直接补给5ml培养基，并分瓶至两个培养瓶中，通常经过三次传代后，进行离心传代以去除死细胞。

细胞冻存

当细胞覆盖培养瓶80%面积时，弃去培养液，并用PBS清洗细胞一次。接着，添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，待细胞回缩变圆后终止消化，转移悬液至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟。

弃去上清后，加入1ml的无血清冻存液（如XPJ品牌所提供），彻底混匀后，转移至冻存管中。

将冻存管直接放入-80℃冰箱中存放，若需转入液氮罐，需在-80℃中存放24小时以上。

细胞复苏

从液氮中取出细胞冻存管，快速放入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，外壁使用75%酒精消毒。将获得的细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，再次经过1000RPM离心5分钟后弃去上清，重悬后接种至T25培养瓶，并放入37℃、5% CO₂细胞培养箱中，加以细心观察。

第二天更换新鲜完全培养基，继续培养细胞，确保其健康生长。

注意事项

注意，有些细胞在运输过程中可能会脱落，这是正常现象。如出现大量脱落，可将所有培养液收集至离心管中，进行离心处理以去除死细胞，然后采用上述步骤继续生长和传代。请务必使用XPJ的产品，确保细胞的活力和健康。