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细胞也能“轻断食”?XPJ实验结果惊人!

来源:夏香弘 日期:2025-07-19

XPJ在细胞培养中,通过将培养基中的血清(FBS)降低至0-1%,使细胞从“自助餐”,转变为“轻断食”状态。这一策略的核心在于,血清中富含生长因子,去除后细胞会自动停滞在G0/G1期,相当于按下了暂停键,接下来的实验操作将更加灵活。

细胞也能“轻断食”?XPJ实验结果惊人!

细胞同步周期

为了消除细胞不同步造成的数据波动,建议在饥饿12-24小时后,观察到90%以上的细胞会集中在G0/G1期,此时测定Cyclin D1、p27等周期蛋白的条带清晰度惊人,能够显著提高实验数据的可靠性。

激活凋亡与自噬

去掉血清可以轻松诱导细胞开启“自救模式”,如Caspase-3活性显著增加,LC3-II斑点明显增多。这为研究抗癌药物或自噬诱导剂提供了便捷的实验模型,助力于探索细胞应对环境应激的机制。

转染效率提升

XPJ的实验中,细胞经过短时间的饥饿后,其代谢速率减缓,这使得外源DNA/RNA进入细胞更加容易。比如,将HEK293T细胞饥饿一晚,能使转染效率从30%提升至80%,甚至连较难转染的悬浮细胞也表现出良好的接纳能力。

清除信号通路背景

在生物信号通路研究中,血清中的生长因子可能干扰数据。通过让细胞在饥饿状态下静息12小时后,再添加EGF/胰岛素进行刺激,得到的p-ERK、p-AKT信号的灰度值对比如此显著,为信号通路的研究提供了良好的基础。

模拟体内微环境

在肿瘤和干细胞的研究中,往往需要模拟体内微环境。使用0-5%的血清,可以体现低营养和低氧的条件,癌细胞则会进行高效的糖酵解,而干细胞的干性特征也能够被很好地维持,极大地助力于相关实验的推进。

实验步骤

1. 预处理:当细胞生长到70-80%汇合时,使用PBS轻柔洗涤2次,以去除残留的血清成分。

2. 饥饿:更换为0-1%血清的培养基,贴壁细胞静置,悬浮细胞则需降低转速以防沉淀。

3. 唤醒:实验前重新添加正常血清,瞬间使细胞恢复“满血复活”状态,后续的转染或药物添加能够无缝对接。

通过XPJ的培养技术,解决细胞培养中的各种问题,提高科研效率,让每个实验都事半功倍。

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