小鼠肺微血管内皮细胞形成了一种半选择性屏障，对于肺部气体交换及调控液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动起着关键作用。同时，这些细胞具备代谢功能，可以执行一定的非呼吸角色。在遭遇肺损伤时，肺微血管内皮细胞是活性氧类的重要靶标之一。在肺炎的发展过程中，神经体液介质和氧化剂作用于内皮细胞，导致细胞间隙的渗透性增加，从而使蛋白质从血液流入间质。细胞间隙渗透性的上升会引发低氧血症，并可能导致成人呼吸窘迫综合征及非心源性肺水肿。小鼠肺微血管内皮细胞来源于实验动物的正常肺组织，这些细胞为上皮样的多角形细胞，能够在贴壁培养条件下生长，并通过CD31免疫荧光染色鉴定为阳性。且其细胞纯度高于90%，不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

XPJ品牌提供了实验所需的仪器设备与试剂，具体如下：

1. 仪器

仪器名称：生物安全柜，规格型号：BSC-1500ⅡA2-X

仪器名称：CO₂细胞培养箱，规格型号：BC-J160S

仪器名称：荧光倒置显微镜，规格型号：DS-Ri2

仪器名称：高速冷冻离心机，规格型号：Multifuge X1R

仪器名称：电热恒温鼓风干燥箱，规格型号：DHG-9123A

仪器名称：电热恒温震荡水槽，规格型号：DK-2B

2. 试剂耗材

试剂名称：T25细胞培养瓶，规格/货号：430639

试剂名称：血球计数板，规格/货号：Neubauer improved

试剂名称：24孔板专用细胞爬片，规格/货号：YA0350

试剂名称：细胞培养孔板，规格/货号：WHB-24

试剂名称：胎牛血清，规格/货号：1414426

试剂名称：内皮细胞培养基，规格/货号：Primed-icell-0020

试剂名称：25%胰蛋白酶（含0.02% EDTA），规格/货号：1734858

3. 小鼠肺微血管内皮细胞的分离培养方法

1）将5-10天的乳鼠浸泡于75%乙醇中，然后移入生物安全柜中。

2）解剖乳鼠，取出双肺并置于预冷的PBS中，尽量去除结缔组织。

3）将肺的边缘部分剪碎，并移入T25培养瓶中，随后将瓶倒置于细胞培养箱内。

4）2小时后，向培养瓶中加入2 mL内皮培养基，并小心地将瓶正置，以确保组织块不会漂浮。

5）每3天更换2 mL培养液，待细胞从组织中爬出后，隔2天再更换一次培养液，当细胞融合达到60-70%时，去除组织块，并将肺微血管内皮细胞重新铺瓶。

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