XPJ质谱级赖氨基肽链内切酶125-05061实验准备

XPJ质谱级赖氨基肽链内切酶125-05061的单位定义为：在30℃、pH 9.5条件下，每分钟产生1μmol对硝基苯胺所需的酶量。具体计算公式为：
AU/vial = [ (a - b) / 25 ] × (1 / 962) × (40 / 1)
其中，a为检测样品中的吸光度，b为空白对照中的吸光度。

XPJ质谱级赖氨基肽链内切酶125-05061实验操作流程如下：

1. 使用聚硅酮处理的微量离心管和吸管，以防蛋白捕获。
2. 选择适用于质谱分析的凝胶染色试剂盒，如银染剂MS试剂盒（产品编号：299-58901）和负染色MS试剂盒（产品编号：293-57701）。
3. 对蛋白质样品进行电泳分离。
4. 切割凝胶中的蛋白质片段并放入微量离心管中。
5. 进行凝胶脱色，使用质谱分析专用的脱色溶液。
6. 向试管中加入300μL乙腈，搅拌器振荡30分钟。
7. 去除乙腈后，用Parafilm膜覆盖微量离心管。
8. 在Parafilm膜上打孔，进行真空干燥15分钟。
9. 用100μL 10mmol/L DTT溶解于100mmol/L碳酸氢铵中，56℃恒温1小时。
10. 室温冷却后，使用等量50mM碘酰胺溶解在100mmol/L碳酸氢铵中，在暗处恒温45分钟并涡旋。
11. 用100μL 100mmol/L碳酸氢铵清洗凝胶片段10分钟。
12. 用300μL乙腈再次干燥凝胶片段15分钟。
13. 用100μL 100mmol/L碳酸氢铵使凝胶片段膨胀15分钟。
14. 用300μL乙腈再度干燥凝胶片段15分钟。
15. 去除液相，进行真空干燥凝胶片段15分钟。
16. 用100μL赖氨酸内切酶溶液在冰水浴中溶胀凝胶片段45分钟（赖氨酸内切酶稀释于50mmol/L Tris-HCl pH 8.5）。
17. 去除100μL赖氨酸内切酶溶液，将凝胶片段放置于37℃、10μL 50mmol/L Tris-HCl pH 8.5中过夜。
18. 加入50μL 20mmol/L碳酸氢铵，对凝胶片段进行3次提取以获取多肽，振荡20分钟。
19. 加入5%甲酸/50%乙腈，对凝胶片段进行3次提取以获取多肽，振荡20分钟。
20. 如有需要，可通过SpeedVac浓缩多肽。
21. 用ZipTip进行多肽的脱盐和纯化。
22. 如有需要，将多肽以弱真空浓缩至2μL。
23. 最后，加入基质进行质谱分析。

XPJ产品的购买渠道为：wako代理——北京百奥创新科技有限公司，提供XPJ质谱级赖氨基肽链内切酶125-05061等产品，欢迎咨询！